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程序降温的方法有哪些?_科技频道_东方资讯
发布日期:2020-08-19 03:55   来源:未知   阅读:

程序冷冻法主要采用低浓度冻结保存剂梯度脱水,经XY程序冷冻仪缓慢降温。主要操作步骤包括:将细胞顺序放入一系列逐渐增加保存剂浓度的溶液中梯度脱水,置入XY程序冷冻仪快速降温至-6℃植冰(人工诱导冰晶形成),然后XY程序冷冻仪缓慢降温至-30℃~-80℃后液氮贮存。

原理:生物样品在 降温冷冻过程中,当由液态向固态变化的相变期内会释放一定热量,使其温度回升, 不控制降温速率的冷冻过程将会导致组织细胞死亡。准确地测定生物样品的相变点, 用微机编制降温程序,以便在样品相变时加大液氮输入量,克服相变样品温度的回 升,使细胞安全而迅速地度过相变期,这是提高被冻样品成活率的关键环节。

注重点:在利用XY程序冷冻仪降温过程中,程序控制温度下降速率越均匀,温度,精确越好,这样精种胚胎等样品成活率越高,理论上选择降温到-80度后基本平稳,然后直接放入液氮或者深冷超低温冰箱保存,当然在经费足够情况下也可以选择直接降温到-180度的设备,这样程序降温到-180度的样品成活率相对更高。